加样方法：特别强调向试剂盒内加样的方法（它是写起来很麻烦，做起来很简单）：每个包装箱内都备有一个金属三角支架，将箱内装的三角支架（如图1），直角向上扣在桌面上，把试剂盒底部靠在或贴在支架一条直角边面上，使试剂盒倾斜约45°角。向大管内加样时，将大管一边靠近实验操作人员，将试剂盒底部靠在或贴在支架一条直角边面上，这样，试剂盒大管在下面倾斜约45°角，操作人员视觉正好看到试剂盒内部的结构（如图2），用无菌吸管吸取样品，对着气门出口位置加样，向哪个大管加样，对准哪个大管的气门出口位置，大管的样品加完后，将试剂盒平拿平放旋转180°，使小管一边靠近实验操作人员，同样，将试剂盒底部靠在或贴在支架一条直角边面上，这样，试剂盒小管在下面倾斜约45°角，操作人员视觉可以看到小管内的结构（如下图3），对准小管内气门出口位置加样，小管的样品加完后，平放试剂盒，看大管和小管的气窗中是否有气泡，依照这样的操作方法，基本上可以保证气窗内没有气泡。加完样品后将试剂盒放置一会儿等培养基扩散开些再观察气泡更易看出。           

接种样品：样品处理好后，用无菌吸管将待检样品按前面所述的加样方法接种于试剂盒的管内，前排三大管内各接种1∶10的均匀稀释液（或液体饮料食品原液）10ml，，后排六小管，其中三管接种1∶10的均匀稀释液（或液体饮料食品原液）1ml，另外三管各接种1∶100的稀释液（或液体饮料1∶10的均匀稀释液）1ml。
观察结果：将接种好样品的试剂盒，盖上盒盖儿，置36±1℃恒温培养箱培养18~24小时取出，平拿平放。观察试剂盒中每一管液体颜色及气窗有无气泡：
管内气窗内无气泡，可继续培养到48h观察报告之
管内气窗内有气泡，继续做复发酵试验。（使用复发酵试剂盒）
 
       另：因液体的扩散速度，有时管内液体有一定的分层不影响观察实验结果。