接种样品：样品处理好后，用无菌吸管将待检样品按前面所述的加样方法接种于试剂盒的管内，前排三大管内各接种1∶10的均匀稀释液（或液体饮料食品原液）10ml，，后排六小管，其中三管接种1∶10的均匀稀释液（或液体饮料食品原液）1ml，另外三管各接种1∶100的稀释液（或液体饮料1∶10的均匀稀释液）1ml。
观察结果：将接种好样品的试剂盒，盖上盒盖儿，置36±1℃恒温培养箱培养18~24小时取出，平拿平放。观察试剂盒中每一管液体颜色及气窗有无气泡：
管内液体颜色为蓝紫色，气窗内无气泡，则报告为大肠菌群阴性；
管内液体颜色变黄，气窗内有气泡，则报告为大肠菌群阳性。
 若做为大肠菌群检测初筛，可记录阳性管数，查MPN检索表报告之。
       另：因液体的扩散速度，有时管内液体有一定的分层不影响观察实验结果。

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